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            7×24小時 服務熱線:400-6111-883  翊圣微信:
            產品名稱: Hieff NGS™ mRNA Isolation Master Kit
            • 產品貨號:12603ES24
            • 產品規格:24T
            • 產品價格:
            • 類別:磁珠與建庫模塊
               
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              價格(元)

              Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit

              12603ES24

              24 T

              2-8℃保存

              616.00

              Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit

              12603ES96

              96 T

              2-8℃保存

              2266.00

              產品描述

              Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit是翊圣生物自主研發的專門用于純化mRNA的磁珠試劑盒。其中的mRNA Capture beads為偶聯了OligodT)的微米級順磁性微球,通過與帶有polyA)尾巴的mRNA相結合,將mRNA0.1-4 μg完整度良好的總RNA進行分離純化。

              產品組分
              組分名稱
              12603ES24
              12603ES96
              1
              mRNA Capture Beads
              1.2 mL
              4.8 mL
              2
              Bead Binding Buffer
              1.2 mL
              4.8 mL
              3
              Beads Wash Buffer
              15 mL
              60 mL
              4
              Tris Buffer
              1.2 mL
              4.8 mL
              5
              Nuclease-free water
              1 mL
              4 mL
              運輸與保存方法

              冰袋運輸。2-8℃存,效期一年。避免冷凍!

              使用方法

              自備材料

              磁力架,Nuclease-free離心管。

              二、操作流程

               

              1 mRNA純化試劑盒操作流程

               

              一、 操作步驟

              3.1 實驗前準備

              mRNA Capture Beads4℃取出,靜置使其溫度平衡至室溫(約30 min)。

              3.2 樣本準備

              在一個Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water0.1-4 μgRNA稀釋至50 μL,冰上放置備用。

              3.3 mRNA與磁珠的結合

              顛倒或渦旋振蕩混勻磁珠,吸取50 μL磁珠懸液加入50 μL RNA樣品中,用移液器反復吹打6次,

              使其充分混勻。

              將磁珠與RNA的混合物置于PCR儀中,65℃5 min4℃hold使得RNA變性。

              室溫孵育5 min,使mRNA與磁珠完全結合。

              將樣品置于磁力架中,室溫靜置5 min,使mRNA與總RNA分離,小心移除上清。

              3.4 樣本的洗滌

              將樣品從磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer用移液器反復吹打6次以徹底混勻

              ② 將樣品置于磁力架中,室溫靜置5 min,小心移除上清。

              重復上一步驟,共洗滌兩次。

              3.5 mRNA樣本第一輪洗脫

              將樣品從磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer重懸磁珠,用移液器反復吹打6次以徹底混勻。

              將樣品放置于PCR儀中,80℃2 min25℃holdmRNA洗脫下來。

              3.6 mRNA與磁珠的再次結合

              加入50 μL Beads Binding Buffer,用移液器反復吹打6次以徹底混勻。

              室溫孵育5 min,使mRNA結合到磁珠上。

              將樣品置于磁力架中,室溫靜置5 min,小心移除上清。

              3.7 樣本的洗滌

              將樣品從磁力架上取出,加入Beads Wash Buffer用移液器反復吹打6次徹底混勻,將樣品重新放回至磁力架中室溫靜置5 min,然后吸除全部上清。

              【注】最后需要用10 μL移液器吸干凈殘留液體。

              3.8 mRNA樣本終洗脫

              方案一:用于逆轉錄反應。

              將樣品從磁力架上取出,加入12 μLNuclease-free water重懸磁珠,用移液器吹打6次以徹底混勻將樣品置于PCR儀中80℃2 min后,立即置于磁力架上室溫靜置5 min待溶液澄清后,小心吸取10 μL上清至另一新的Nuclease-free PCR管中。

              方案二:用于RNA文庫的構建。

              可根據相關試劑盒說明書加入相應體積的Frag/Primer Buffer,進行文庫構建。

              【注】:樣品可置于冰上繼續進行NGS文庫構建或其他分析應用(建議立即進行后續反應),也可以置于-80℃保存。

              注意事項

              1)磁珠使用前務必要回溫至室溫,并充分混勻,否則可能影響樣品的回收效率。

              2)操作過程要嚴格保證無RNase酶和核酸污染。

              3本產品和其他試劑配套使用時,請按照具體實驗說明來進行操作。

              4)想要獲得好的純化效果,需要有完整度良好的總RNA,確保RIN值在7.0及以上。

              5)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

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