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            7×24小時 服務熱線:400-6111-883  翊圣微信:
            產品名稱: Hieff NGS™ Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module 快速末端修復/A尾添加模塊
            • 產品貨號:12608ES24
            • 產品規格:24T
            • 產品價格:
            • 類別:磁珠與建庫模塊
               
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              產品名稱

              產品編號

              規格

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              價格(元)

              Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module

              快速末端修復/A尾添加模塊

              12608ES24

              24T

              -20℃

              2066.00

              12608ES96

              96T

              -20℃

              6166.00

              產品描述

              Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module針對Illumina®高通量測序平臺文庫構建而專業設計的DNA末端修復/A尾添加模塊,具有高效、快速、易實現自動化的優勢。本產品兼1 ng-1 μg片段化Input DNA,可在單管內實現片段化DNA的末端補平、5端磷酸化和3端加A尾反應,得到5末端含磷酸基團3端帶有dA突出的DNA產物。該產物無需純化,即可使用Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607)進行文庫構建接頭連接反應。

              本產品已Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607),2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master MixCat#12620)共同用于DNA文庫構建,通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。產品中提供的所有試劑組分均經過嚴格質檢,最高程度保障產品優異性能與批間穩定性。

              產品組分

              組分名稱

              24 T

              96 T

              End Repair/dA-Tailing Buffer

              144 μL

              576 μL

              End Repair/dA-Tailing Enzyme

              96 μL

              384 μL

              質量控制

              Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme 

              1. SDS-PAGE純度:>95%

              2. 核酸內切酶活性50 μL反應體系中加入10 μL本酶和1 μg φX174 RF I DNA37°C孵育4小時。經瓊脂糖凝膠電泳檢測,RF II轉化比率<10%

              3. 磷酸酶活性:在磷酸酶活性檢測緩沖液中加入10 μL本酶和2.5 mM對硝基苯磷酸,37°C孵育4小時。經光譜測定法檢測,405 nm處無對硝基苯陰離子特征吸收峰。

              4. 功能活性:在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme中加入1 μL本酶和0.5 μg包含53突出末端的片段化DNA25°C孵育20分鐘。經毛細管電泳檢測,末端修復、加dA尾并磷酸化的DNA比率>95%

              Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer

              1. 16小時孵育檢測:50 μL反應體系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer1 μg HindIII-λDNA37°C孵育16小時。經瓊脂糖凝膠電泳檢測,條帶無降解;50 μL反應體系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer1 μg T3 DNA37°C孵育16小時。經瓊脂糖凝膠電泳檢測,條帶無降解。

              2. 核酸內切酶活性50 μL反應體系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer1 μg φX174 RF I DNA37°C孵育4小時。經瓊脂糖凝膠電泳檢測,RF II轉化比<10%

              3. RNase活性:在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer中加入40 ng FAM-RNA37°C孵育16小時。經聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測,條帶無降解。

              4. 磷酸酶活性:在磷酸酶活性檢測緩沖液中加入1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer2.5 mM對硝基苯磷酸,37°C下孵育4小時。經光譜測定法檢測,405 nm處無對硝基苯陰離子特征吸收峰。

              測序驗證

              本品Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607),2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master MixCat#12620)共同用于DNA文庫構建,已通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。

              運輸與保存方法

              冰袋運輸。-20℃保存,效期1

              注意事項

              為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

              使用方法

              1. 將表1中各試劑解凍后,顛倒混勻,置于冰上備用。

              2. 于無菌PCR管中配制表1所示反應體系。

              1 末端修復/dA尾添加PCR反應體系

              名稱

              體積(μL

              Fragmented DNA

              x

              End Repair/dA-Tailing Buffer

              6

              End Repair/dA-Tailing Enzyme

              4

              ddH2O

              Up to 60 μL

              3. 使用移液器輕輕吹打或振蕩混勻,并短暫離心將反應液離心至管底。

              4. 將上述PCR管置于PCR儀,設置表2所示反應程序,進行末端修復/dA尾添加反應。

              2 末端修復/dA尾添加PCR反應程序

              溫度

              時間

              熱蓋105°C

              On

              20°C

              30 min

              65°C

              30 min

              4°C

              Hold

              5. 產物如需純化,可使用Hieff NGSTM DNA Selection BeadsCat#12601AMPure XP BeadsCat#A63880或其他等效產品

              相關產品

              建庫模塊

              產品編號

              規格

              價格(元)

              Hieff NGSTM Smarter DNA Clean beads

              12600ES03

              1 mL

              386.00

              12600ES08

              5 mL

              1386.00

              12600ES56

              60 mL

              7586.00

              12600ES75

              450 mL

              29886.00

              Hieff NGSTM DNA Selection BeadsSuperior Ampure XP alternative

              12601ES03

              1 mL

              296.00

              12601ES08

              5 mL

              986.00

              12601ES56

              60 mL

              6286.00

              12601ES75

              450 mL

              26186.00

              Hieff NGSTM End Repair Module

              12605ES20

              20 T

              1466.00

              Hieff NGSTM dA-Tailing Module

              12606ES20

              20 T

              1766.00

              Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation Module

              12607ES24

              24 T

              3266.00

              12607ES96

              96 T

              10866.00

              Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Fragmentation Reagent

              12609ES50T

              50 T

              1466.00

              Hieff NGSTM Single-Indexed Adapter Kit for Illumina®, Set 1

              12611ES24

              24 T

              1166.00

              12611ES96

              96 T

              4366.00

              Hieff NGSTM Single-Indexed Adapter Kit for Illumina®, Set 2

              12612ES24

              24 T

              1166.00

              12612ES96

              96 T

              4366.00

              Hieff NGSTM Dual-Indexed Adapter Kit for Illumina® 

              12614ES96

              96 T

              6566.00

              Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1

              12615ES04

              12×4 T

              1256.00

              12615ES16

              12×16 T

              4536.00

              Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2 

              12616ES04

              12×4 T

              1256.00

              12616ES16

              12×16 T

              4536.00

              2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for Library Amplification

              12620ES03

              1ml

              526.00

              12620ES08

              5×1ml

              1426.00

               

              版本號:HB170720

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