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            强力Hieff? Robust PCR master mix——提升PCR成功率,大幅减少扩增时间

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            研发背景

            Hieff? Robust PCR Master Mix是一款高检出率型PCR预混?#28023;?#36890;过酶结构的改造、筛选及Buffer的优化,解决了常规PCR Mix检出率低、产量低的问题。另外,延伸速度提升至15-30 s/kb,可用于基因?#30446;?#36895;克隆。

            产品描述

            Hieff? Robust PCR Master Mix是预混PCR反应所需的各类组分的预混?#28023;?#20165;需加入模板和引物即可进行PCR扩增。因采用酶工程改造筛选的强力型Taq酶和高效扩增Buffer,该产品的扩增检出率大大提升,可解决绝大多数PCR反应。


            产品特点

            ○ 扩增速度达15-30 s/kb,极限速度5 s/kb

            ○ 扩增长度1-4 kb

            ○ 模板适用性广

            ○ 靶基因GC耐受范围35-70%

            产品数据

            1.延伸速度30s/kb,极限延伸速度5s/kb

             

            1542172798700487.png

            图1:以小鼠基因组为模板,不同延伸速度(5 s/kb-60 s/kb)扩增2 kb大小的片段。PCR结束后取4 μL进行电泳检测。a为Hieff? Robust PCR Mix,b-d为其他品牌普通型PCR Mix,e为快速型PCR Mix。Marker:1 kb DNA ladder。

             

            2.扩增长度4kb,扩增时间更短

            1548898802734903.png

            图2:以小鼠基因组为模板,分别扩增1-4 kb的目的片段,PCR反应条件使用各公司推荐的PCR反应条件,PCR反应结束后,取4 μL进行电泳检测。Marker:1 kb DNA ladder。

             

            1542172913798664.png

            3.适用于动植物基因组及菌落PCR实验

            1542172941768087.png

            图3:以人基因组DNA(1)、拟南芥基因组DNA(2)、水稻基因组DNA(3)、小鼠基因组DNA(4)、菌?#28023;?)、质粒DNA(6)为模板,30s/kb延伸速度条件下分别扩增大小为0.5 kb、1 kb、2 kb、4 kb的片段,PCR结束后取4uL进行电泳检测。Marker:1kb DNA ladder。

            产品应用

            基因快速克隆、菌落PCR、TA克隆?#21462;?/span>

            FAQ

            Q:产品保质期、运输问题

            A:冰袋运输。-20℃,保质期2年。

            Q:该产品扩增的PCR产物可用于PAGE胶电泳吗?

            A:不可以。

            Q:该产品可以用于扩增鼠尾、植物裂解液等粗制模板吗?

            A?#21644;?#33616;10108 Hieff? HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) 用于粗制模板的扩增。

            Q:出现非特异性扩增的解决方案?

            A:理论上,采用该产品的建议扩增条件,可以解决大部分基因扩增。?#32972;?#29616;非特异性扩增时,可尝试将退火温度梯度上升2℃解决。

            Protocol

            以小鼠DNA扩增1kb基因举例说明:

            体系配制

            组分

            体积

            终浓度

            ddH2O

            to 50 μL

            -

            模板DNA

            50 ng

            -

            Primer正向 (10 μM)

            2.5 μL

            0.5 μM

            Primer反向 (10 μM)

            2.5 μL

            0.5 μM

            2×HieffTM HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye)

            25 μL

             

            反应程序

            循环步骤

            温度

            时间

            循环数

            预变性

            95℃

            5 min

            1

            变性

            95℃

            10 sec

            30

            退火

            55℃

            20 sec

            延伸

            72℃

            30 sec/kb

            终延伸

            72℃

            5 min

            1

             

            订购信息

            产品名称

            货号

            规格

            购买/试用

            Hieff? Robust PCR Master Mix(With dye)

            10106ES03

            1 mL

            65.00

            10106ES08

            5 mL

            265.00

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            货号

            规格

            价格(元)

            Hieff? PCR Master Mix(With dye)

            10102ES08

            5 mL

            150.00

            Hieff? HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye)

            10108ES08

            5 mL

            345.00

            Hieff Canace? Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶

            10148ES60

            100 U

            683.00

            了解?#35789;?/span>


            上海?#35789;?#29983;物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd.)成立于2009年,是一家致力于分子酶原料及其相关试剂盒研发、生产的高新技术型企业。公司总部设在上海国际医学园区,在全国(近)一线城市设有办事处和仓储物流,兼之健全的代理商体系,服务于全国各级科研单位、体外诊断和第三方检测机构、生物医药公司等2.5万家?#31361;А?/span>

             

            上海?#35789;?#29983;物科技有限公司的主要研发人员来自国内一线科研?#26680;?#22914;中科院、上海交大、武汉大学、华东师范大学、厦门大学、上海师范大学和南京农业大学?#21462;q词?#32856;请组建了顶级的技术顾问团队,成员来自国内外一流大学,如耶鲁大学,加州伯克利、中科院大学等等,拥有丰富的科研经验以及外企工作的经历。优秀的人才是?#35789;?#20135;品的品质保证,优秀的人才是?#35789;?#30340;未来。

             


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